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抗 β-肌動(dòng)蛋白兔單克隆抗體加載控制目錄編號(hào): AT0009Actin 是高度保守的蛋白質(zhì)，參與各種類型的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，并在所有真核細(xì)胞中普遍表達(dá)。該抗體在 Jurkat、 A431、 HEK293、 HepG2、 MCF-7、 NIH3T3和 PC12全細(xì)胞裂解物中均呈陽(yáng)性信號(hào)。這種抗體在下列 FFPE 組織中的 iHC 呈陽(yáng)性反應(yīng): 人類正常皮膚和 IF 中的 HeLa 細(xì)胞系。
大小: 100μL 濃度: 1毫克/毫克可用性: 庫(kù)存 概述抗 -β-肌動(dòng)蛋白兔單克隆抗體反應(yīng)性小鼠，大鼠，人體測(cè)試應(yīng)用 WB: 1/1000-1/10000尚未在其他應(yīng)用中測(cè)試。最佳稀釋度/濃度應(yīng)由最終用戶確定。產(chǎn)品圖片 人 β-肌動(dòng)蛋白1-100殘基中的免疫原合成肽。克隆性單克隆，克隆號(hào): 9E6同種型兔 IgGForm 液體防腐劑: 0.02% 氮化鈉成分: 1% BSA，PBS。PH7.4貯存指引短期(1-2星期)貯存在攝氏4度以下。分量存放于攝氏零下20度或80度。避免重復(fù)的凍結(jié)/解凍循環(huán)。所有泳道: 1:5000泳道的抗 β-肌動(dòng)蛋白抗體-負(fù)載控制(AT0009)1: Jurkat (人類 T 細(xì)胞淋巴細(xì)胞樣細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物泳道2: A431(人類上皮癌細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物泳道3: HEK293(人類胚胎腎細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物泳道4:HepG2(人肝細(xì)胞肝癌細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物巷5: MCF7(人乳腺癌細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物巷6: NIH 3T3(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系)全細(xì)胞裂解物/蛋白質(zhì)每泳道30μg。在1/3000稀釋條件下對(duì)兔 IgG-H 和 L- 預(yù)吸附(HRP)進(jìn)行山羊次級(jí)多克隆。蛋白質(zhì)印跡: β-肌動(dòng)蛋白兔單克隆抗體(AT0009)使用1:1000稀釋的該抗體分析不同裂解物上的 β-肌動(dòng)蛋白。1號(hào)車道: HEK293,2號(hào)車道: Hela，3號(hào)車道: PC-12,4號(hào)車道: NIH/3T3
細(xì)胞骨架由三種類型的胞質(zhì)纖維組成: 微管，微絲(肌動(dòng)蛋白絲)和中間絲。球形微管蛋白亞基包括微管構(gòu)建塊，α/β-微管蛋白異二聚體形成所有真核細(xì)胞共有的微管蛋白亞基。需要 γ-微管蛋白使微管蛋白亞基的聚合成核，從而形成微管聚合物。許多細(xì)胞運(yùn)動(dòng)是由微管作用介導(dǎo)的，包括纖毛和鞭毛的跳動(dòng)，膜囊泡的細(xì)胞質(zhì)運(yùn)輸，減數(shù)分裂/有絲分裂期間的染色體排列和神經(jīng)細(xì)胞軸突遷移。這些運(yùn)動(dòng)是由于競(jìng)爭(zhēng)性微管聚合和解聚或通過微管運(yùn)動(dòng)蛋白的作用。容量: 100ul容量: 1毫克/毫升可用性: 庫(kù)存概述/小鼠對(duì) β-微管蛋白的單克隆抗體加載控制反應(yīng)性人、小鼠、大鼠、兔、猴、牛、倉(cāng)鼠。經(jīng)測(cè)試的申請(qǐng): 1/2000-1/10000。預(yù)測(cè)分子量: 55kDa。尚未在其他應(yīng)用程序中測(cè)試。最佳稀釋度/濃度應(yīng)由最終用戶確定。產(chǎn)品圖片 這種抗體檢測(cè)內(nèi)源性 β 微管蛋白水平。人 β-微管蛋白氨基末端相應(yīng)的免疫原合成肽?？寺?span>/單克隆，克隆號(hào): 6C4同種型小鼠 IgG1表型液，1mg/mL 小鼠單克隆免疫球蛋白100μg，pH7.3(+/-0.1) ，50% 甘油0.1 mg/mL 牛血清白蛋白(IgG，無蛋白酶)作為穩(wěn)定劑，0.02% 氮化鈉作為防腐劑。貯存指引短期(1-2星期)貯存在攝氏4度以下。配料及貯存在攝氏零下20度，避免冷凍/解凍循環(huán)。數(shù)據(jù)庫(kù)鏈接 SwissProt: P07437 HumanSwissProt: P99024 MouseSwissProt: P69897 RatHostMouse 應(yīng)用程序 WB ImageWestern 印跡顯示人腦(小腦)組織，人腦(下丘腦)組織，小鼠腦(小腦)組織和小鼠腦(干)組織的裂解物。在大約55kDa (如所示)檢測(cè)到 β 微管蛋白的特異性條帶。本實(shí)驗(yàn)是在還原條件下進(jìn)行的。蛋白質(zhì)印跡程序1。在0.5毫升冰冷的細(xì)胞裂解緩沖液中裂解大約107個(gè)細(xì)胞(配方如下)。該緩沖液是一種修飾的 RIPA 緩沖液，適用于回收大多數(shù)蛋白質(zhì)，包括膜受體、細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白和可溶性蛋白。這種細(xì)胞裂解緩沖制劑可作為一個(gè)單獨(dú)的產(chǎn)品，需要補(bǔ)充蛋白酶抑制劑立即使用前(貓。# FNN0011，溫度計(jì))。其他細(xì)胞裂解緩沖液制劑，如 Laemmli 樣品緩沖液和 Triton-X 100緩沖液，也與本程序兼容。對(duì)于每個(gè)特定的應(yīng)用，可能需要對(duì)細(xì)胞刺激方案和細(xì)胞裂解過程進(jìn)行額外的優(yōu)化。2.將裂解物以14,000 x g 離心10分鐘，清除細(xì)胞碎片。或者，裂解物可以在100,000 x g 下超離心30分鐘以獲得更大的澄清。3.小心地將澄清的細(xì)胞裂解物倒入干凈的試管中，并用合適的方法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度，如布拉德福德試驗(yàn)。建議使用聚丙烯管儲(chǔ)存細(xì)胞裂解物。4.用等體積的2xLaemmli 樣品緩沖液(125mM Tris，pH6.8,10% 甘油，10% sDS，0.006% 溴酚藍(lán)和130mM 二硫蘇糖醇[ dTT ])反應(yīng)裂解物的等分試樣，并在100 °C 下將混合物煮沸90秒。5.將10 ~ 30μg 的細(xì)胞裂解物加入適當(dāng)?shù)膯我话俜直然蛱荻任⒛z孔中，用 SDS-PAGE 電泳分離蛋白質(zhì)。6.在準(zhǔn)備西藥轉(zhuǎn)移時(shí)，切一塊比凝膠稍大的 PVDF。膜在甲醇中浸泡1分鐘，然后用 DDH2O 沖洗5分鐘?；蛘?，可以使用硝化纖維素。7.在轉(zhuǎn)移緩沖液(配方如下)中浸泡薄膜、2片 Whatman 紙和 Western 儀器海綿2分鐘。8.將凝膠和薄膜組裝到夾層裝置中。9.將蛋白質(zhì)以140mA 的溫度在室溫下轉(zhuǎn)移6 ° C 0-90分鐘。10.轉(zhuǎn)移后，用 Tris 緩沖鹽水沖洗膜2分鐘。11.用封閉緩沖液(配方如下)在4 °C 下封閉膜過夜，或在室溫下封閉膜一小時(shí)。12.在補(bǔ)充有1% 無 Ig BSA 和0.1% 吐溫 -20的 Tris 緩沖鹽水中以1:1000起始稀釋度將封閉的印跡與一抗在4 °C 孵育過夜或在室溫下孵育2小時(shí)。13.用添加0.1% 吐溫20的 Tris 緩沖鹽水洗滌印跡。14.使用合適的第二抗體，如山羊抗兔 IgG 結(jié)合的 HRP (Cat。# AT0097-100ul，Engibody)或山羊抗小鼠 IgG 結(jié)合 HRP (Cat。# AT0098-100ul，Engibody)與您的化學(xué)發(fā)光試劑和儀器一起使用。故障排除指南西部印跡故障排除1。沒有信號(hào)。高背景3。非特定波段4。波段大小錯(cuò)誤5。黑色/灰色污點(diǎn)上的白色條紋6。“抹黑"1。故障排除: 無信號(hào)樣品準(zhǔn)備•未經(jīng)測(cè)試的物種？積極控制。檢查校準(zhǔn)。?樣本中或凝膠上的抗原不足。轉(zhuǎn)移到膜上•轉(zhuǎn)移不良。?過度清洗。阻塞•太多阻塞。優(yōu)化封閉劑、濃度和時(shí)間•交叉反應(yīng)封閉劑/抗體?？贵w孵化和檢測(cè)•抗體不足。?第二抗體不正確。•檢測(cè)試劑盒舊基質(zhì)無效。2.故障排除: 高背景轉(zhuǎn)移到膜. 膜的選擇。阻塞•需要阻塞更長(zhǎng)時(shí)間。•優(yōu)化封堵劑、濃度。•封閉劑與一級(jí)或二級(jí)封閉劑之間的交叉反應(yīng)。?磷酸化特異性蛋白質(zhì): 使用酪蛋白阻斷?？贵w孵化和檢測(cè)•一級(jí)抗體濃度過高。?孵化溫度過高。3.故障排除: 非特異性條帶樣品制備•細(xì)胞系在其蛋白質(zhì)表達(dá)譜上可以積累差異。•蛋白質(zhì)有多種修飾形式，改變了流動(dòng)性。目標(biāo)蛋白質(zhì)成片段-被蛋白酶降解或切割。•剪接變體/同種型或可能來自同一家族的蛋白質(zhì)。?蛋白質(zhì)的多聚體(二聚體)(還原和變性)。•樂隊(duì)可能不是特定的。運(yùn)行無主控制阻塞•阻塞不足。優(yōu)化注意力，時(shí)間?？贵w孵化和檢測(cè)•一級(jí)或二級(jí)抗體濃度過高。抗體尚未提純。
4.故障排除: 不正確的帶寬大小樣本準(zhǔn)備•確保樣本減少和變性，除非在數(shù)據(jù)表中另有說明。•檢查異構(gòu)體。•樣本是否為重組片段？這些將運(yùn)行在不同的大小。5.故障排除: 白色條帶/黑色印跡•過多的一級(jí)抗體和/或過多的二級(jí)抗體。6.故障排除: “涂抹"•過載，蛋白質(zhì)降解。
北京華新康信也有Camtag實(shí)驗(yàn)試劑銷售，下面給大家講講Camtag服務(wù)以及實(shí)驗(yàn)樣本；Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin Camtag實(shí)驗(yàn) Camtag試劑 Camtag說明 Camtag產(chǎn)品方案Camtag實(shí)驗(yàn)說明 Camtag說明書 Camtag技術(shù)參數(shù) Camtag方案對(duì)比 Camtag優(yōu)勢(shì)介紹 Camtag廣州實(shí)驗(yàn)試劑 Camtag深圳試劑Camtag說明書 Camtag技術(shù)參數(shù)Camtag實(shí)驗(yàn)方案Camtag技術(shù)對(duì)比Camtag購(gòu)買說明 Camtag天津試劑 Camtag北京試劑Camtag廈門試劑Camtag大理試劑Camtag武漢試劑Camtag福建試劑Camtag安徽試劑Camtag廣西試劑Camtag廈門試劑Camtag常州試劑Camtag安徽試劑Camtag長(zhǎng)沙試劑Camtag哈爾濱試劑Camtag沈陽(yáng)試劑Camtag深圳試劑Camtag武昌試劑Camtag湖北試劑Camtag湖南試劑Camtag上海試劑Camtag ForteBio實(shí)驗(yàn)試劑，moltox實(shí)驗(yàn)試劑，toxin實(shí)驗(yàn)試劑，ForteBio moltox toxin 各種試劑的實(shí)驗(yàn)參數(shù)，說明書，歡迎咨詢 Camtag產(chǎn)品介紹 Camtag產(chǎn)品介紹 Camtag研究方案
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